Novel techniques for the quantification of protein biomarker isoforms by liquid chromatography and mass spectrometry
| Promotie: | B. Sleumer, MSc |
| Wanneer: | 03 juni 2024 |
| Aanvang: | 14:30 |
| Promotors: | prof. dr. N.C. van de Merbel, prof. dr. I.P. (Ido) Kema, prof. dr. R.P.H. Bischoff |
| Waar: | Academiegebouw RUG |
| Faculteit: | Science and Engineering |
LC-MS/MS onmisbaar voor gespecialiseerd onderzoek naar relevantie biomarkerisovormen
In de klinische diagnostiek spelen (eiwit)biomarkers een cruciale rol bij het onderscheiden van gezonde en zieke individuen en het monitoren van de effectiviteit van de behandeling van ziekten. Eiwitbiomarkers worden traditioneel door ligand binding assays (LBAs) gekwantificeerd, maar LBAs worden soms beperkt door inconsistente reagentia. Bovendien kunnen LBAs vaak geen onderscheid maken tussen eiwit-isovormen, wat hun klinische relevantie beperkt.
Vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie (LC-MS/MS) is opgekomen als een robuust alternatief voor de kwantificering van eiwitbiomarkers, en heeft het vermogen om onderscheid te maken tussen verschillende eiwitten en isovormen. LC-MS/MS heeft echter ook uitdagingen zoals lagere gevoeligheid en hogere operationele kosten. Het proefschrift van Bas Sleumer verkent de mogelijkheden van LC-MS/MS voor eiwitbiomarkeranalyse, met de nadruk op de kwantificering van relevante biomarker-isovormen.
De verschillende hoofdstukken gaan in op methoden voor het kwantificeren van specifieke isovormen, zoals verschillende varianten van het humane groeihormoon (GH) en het geslachtshormoon bindend globuline (SHBG). Deze methoden tonen goede accuraatheid, precisie, selectiviteit en stabiliteit over de klinisch relevante concentratiebereiken van de verschillende isovormen. Op deze manier helpt LC-MS/MS bij het verkrijgen van inzicht in de rol van de isovormen van eiwitbiomarkers, wat moeilijker of onmogelijk is met LBAs.
Al met al biedt LC-MS/MS voordelen ten opzichte van LBAs, met name in het onderscheiden van eiwitisovormen. LBA blijft de gouden standaard voor routineanalyse, maar LC-MS/MS zal onmisbaar zijn voor meer gespecialiseerd onderzoek naar de relevantie van biomarkerisovormen en om duidelijkheid te bieden wanneer resultaten van routine-immunoassays onduidelijk of tegenstrijdig zijn. We verwachten daarom dat LC-MS/MS een blijvertje is in klinische laboratoria.